摘要
 

　　建立了一套同時支持兩套溶出儀的全自動溶出、在線稀釋和檢測系統(tǒng)，重點研究了兩套溶出儀、雙取樣泵、雙補液系統(tǒng)、稀釋平臺、UV進樣系統(tǒng)和UV檢測工作時的時序調(diào)度，確保整套方案在符合藥典要求的情況下，各子系統(tǒng)之間不會發(fā)生沖突，并達到效率的目的。系統(tǒng)采用鹽酸氨溴索片進行驗證，在30mins內(nèi)采樣5次，共60個樣品，并自動協(xié)調(diào)稀釋、進樣和檢測等過程，實驗表明，采用該時序調(diào)度的方案可確保實驗結(jié)果符合要求，并且在現(xiàn)有方法上將效率提高了100%以上。
 

　　正文
 

　　隨著仿制藥一致性評價等工作的開展，各相關藥品檢測單位和制藥企業(yè)的儀器及設備配套有必要進一步完善。為此，特建立了一套同時全自動雙溶出、在線稀釋和檢測系統(tǒng)。與市場上現(xiàn)有的自動溶出儀相比，該系統(tǒng)不僅能完成前者具備的溶出、采樣和補液工作，還具備自動稀釋、UV進樣、UV檢測以及數(shù)據(jù)分析等功能。此外，為滿足一致性評價和客戶批量處理樣品的需求，系統(tǒng)還同時接入了兩套溶出儀。
 

　　系統(tǒng)采用鹽酸氨溴索(ambroxolhydrochloride，1)片的溶出度試驗進行驗證。1為溴己新的活性代謝產(chǎn)物，主要用于急慢性支氣管炎、哮喘性支氣管炎、支氣管擴張、肺結(jié)核等引起的咳痰困難及手術前后咳痰困難[1]。由于1屬速溶型藥物，溶出曲線的取樣時間點設計為5、10、15、20及30min，為使最終數(shù)據(jù)具統(tǒng)計學意義(n≥10)，每批次試驗樣品數(shù)量設計為12片，該工作具有采樣時間間隔短、樣品數(shù)量多且勞動強度大的特點，可用以充分驗證系統(tǒng)在復雜條件下的工作狀況。
 

　　1方案概況
 

　　全自動雙溶出在線稀釋和檢測系統(tǒng)是指能同時支持兩套溶出儀，并且可以自動完成溶出、取樣、補液、稀釋、UV進樣、讀數(shù)、數(shù)據(jù)分析和打印報告等溶出全過程的溶出系統(tǒng)，
 

　　2雙溶出系統(tǒng)時序研究
 

　　由于雙溶出系統(tǒng)同時支持兩套溶出儀、兩臺采樣泵、兩套補液系統(tǒng)、稀釋平臺、進樣子系統(tǒng)和UV檢測器等多個儀器，這些儀器可能來源于不同廠家，所以其系統(tǒng)架構(gòu)和工作模式非常復雜，尤其是如何協(xié)調(diào)各儀器和子系統(tǒng)之間的工作流程。本文針對該系統(tǒng)進行了時序研究。
 

　　2.1時序設計原則
 

　　考慮到溶出試驗的要求和系統(tǒng)架構(gòu)，在設計時序時的首要考慮是符合藥典要求，具體原則如下。
 

　　①溫度控制：很多溶出儀只有一個溫度計測量水浴溫度，無法測量各個溶出杯中的實際溫度，因此系統(tǒng)收到的反饋溫度有可能不是溶出杯中的實際溫度，在計算時序時必須預留足夠的升溫時間。對于可以檢測到每個杯內(nèi)溫度的溶出儀，可忽略此升溫時間。
 

　　②優(yōu)先采樣：對溶出度/釋放度試驗而言，采樣時間是影響結(jié)果的關鍵指標之一。因此在雙溶出系統(tǒng)的工作時序中，采樣具備優(yōu)先級，即無論系統(tǒng)在干什么，只要到了采樣時間，系統(tǒng)就必須優(yōu)先完成采樣。
 

　　③提高效率：對整個溶出過程而言，如果每個樣品都是按部就班地進行溶出→采樣→稀釋→進樣→讀數(shù)→數(shù)據(jù)分析，效率太低，尤其是對于需要多點溶出的藥品。系統(tǒng)擁有合理的時間調(diào)度機制，使系統(tǒng)能夠見縫插針地利用各個時間片段，進行持續(xù)不斷的工作。
 

　　④清洗片段：為了確保空白品、標準品和各樣品之間沒有交叉污染，在處理每個不同空白品、標準品或樣品之間都添加了較小的時間片段，確保該時間片段內(nèi)系統(tǒng)完成采樣針及液路的清洗。
 

　　⑤防止沖突：因為兩個溶出儀中12個樣品的采樣、稀釋和進樣3個過程都需要用到ASP2000的同一機械臂，因此必須計算時間提前量，并且設計緊急情況處理機制。
 

　　2.2時序調(diào)度流程
 

　　基于上述原則，本研究針對雙溶出系統(tǒng)設計了相應的時序調(diào)度流程(見圖2)，并通過軟件使之實現(xiàn)。具體說明如下：啟動系統(tǒng)后，系統(tǒng)1開始投片，間隔約3min系統(tǒng)2開始投片(階段一)。系統(tǒng)1采樣時間到達之前進行液路清洗，然后在系統(tǒng)1采樣時間點系統(tǒng)1完成采樣，隨后進行補液；同時，在系統(tǒng)2采樣時間點系統(tǒng)2完成采樣，隨后進行補液(階段二)。在下個采樣時間到來之前進行標準品的稀釋、空白品和標準品的UV進樣及檢測(階段三)。當采樣時間到來之前，系統(tǒng)將優(yōu)先保證采樣工作，將空白品及標準品的工作(階段三)暫停，首先完成各系統(tǒng)的采樣工作(階段二)，完成后再進行之前懸掛的空白品及標準品的工作(階段三)。之后逐一稀釋樣品并UV進樣檢測。檢測完成后，自動進行數(shù)據(jù)分析并打印報告。
 

　　3驗證方法與結(jié)果
 

　　本試驗選取了1片進行系統(tǒng)驗證，試驗要求30mins內(nèi)采樣5次，共60個樣品，稀釋并進樣檢測。
 

　　3.1儀器與試藥
 

　　本試驗采用英國實驗室自動化公司(ALS)提供的ASP2000型雙溶出在線稀釋及檢測方案進行驗證
 

　　對照品(中國食品藥品檢定研究院，純度100%，批號100599-200502)；1片(上海勃林格殷格翰藥業(yè)有限公司，規(guī)格30mg，批號084726)；試劑均為分析純，水為純化水。
 

　　3.2溶出度試驗方法
 

　　依照溶出度測定法(中國藥典2010年版二部附錄XC)中槳法，分別以水、0.1mol/L鹽酸、pH4.5乙酸緩沖液和pH6.8磷酸緩沖液900ml為溶出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速50r/min，分別于5、10、15、20和30min時各取溶液10ml并過濾，作為供試品溶液，即時回補相同體積的溶出介質(zhì)。另取1對照品適量，加相應溶出介質(zhì)溶解并稀釋，制成約33μg/ml的溶液，作為對照品溶液。取供試品溶液(稀釋2倍)和對照品溶液，參照UV法(中國藥典2010年版二部附錄IVA)，在244nm波長處測定吸光度D，計算每片在不同時間點的溶出量。
 

　　3.3樣品溶出結(jié)果
 

　　按“3.2”項下方法，在4種不同介質(zhì)內(nèi)對同一批次的12個樣品進行溶出度檢測，同時，還將在各介質(zhì)中的樣品溶出度與手工操作(溶出儀自動取樣，人工完成樣品的稀釋及UV測定)數(shù)據(jù)進行對比(圖4)，結(jié)果基本一致。
 

　　3.4工作效率比較
 

　　比較了ASP2000系統(tǒng)和手工操作的耗時，人有效工作時間。該系統(tǒng)較手工方式相比效率大幅提高。工操作需時4min/個，該試驗共240個樣品，共耗時960min。而使用ASP2000系統(tǒng)該項工作*由系統(tǒng)自動完成，無需人工干預，無需消耗人工時間。ASP2000系統(tǒng)具有自動繪制溶出曲線及數(shù)據(jù)分析的功能，使用者還可省去數(shù)據(jù)分析的時間。此外，ASP2000系統(tǒng)還可利用夜間時間進行工作，增加了有效工作時間。該系統(tǒng)較手工方式相比效率大幅提高。
 

　　4討論
 

　　本研究采用1片的溶出度試驗驗證了全自動雙溶出在線稀釋及檢測系統(tǒng)的時序設計，結(jié)果表明本法精度、可靠性都較高，并且能大幅降低勞動強度，提高工作效率，適合于各種片劑和膠囊的釋放度研究。系統(tǒng)數(shù)據(jù)與手工試驗數(shù)據(jù)對比結(jié)果顯示，兩組數(shù)據(jù)具有一致性。